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1） 防止模板中的重復(fù)序列互補結(jié)合，擴增較長片段 PCR技術(shù)由于可以特異性擴增極微量的DNA片段，而在法醫(yī)學(xué)、親子鑒定和分子生物學(xué)研究中得到廣泛的運用。但是，由于擴增的DNA片段中可能含有多個不規(guī)則重復(fù)序列，這寫含有重復(fù)序列的基因可以在退火時發(fā)生模版鏈內(nèi)或鏈間雜交從而妨礙較長序列DNA的擴增。PNA的出現(xiàn)決絕了這個問題。在PRC反應(yīng)體系中，加入與DNA模版中間重復(fù)序列互補的PNA片段，該PNA片段與DNA模版退火雜交，從而封閉已變性的DNA模版中的重復(fù)序列。PNA與DNA模板退火退火雜交溫度一般較高（78℃），在此溫度下，模板中間的重復(fù)序列彼此不會雜交，當(dāng)PNA封閉已變性的DNA模板中的重復(fù)序列后，降低溫度使PCR引物與變性的DNA模版兩端雜交（溫度一般為60攝氏度），然后升高溫度（72℃）以完成PCR反應(yīng)的延伸過程，與此同時將PNA與模板分離。用此方法可以擴增出較長的DNA片段。
2） 捕獲特異性片段 從復(fù)雜的混合物中捕獲特異性DNA和RNA片段，捕獲效率和特異性方面比使用DNA更好。Boffa等用生物素標(biāo)記的PNA先與染色體中互補DNA片段結(jié)合，再與磁性親和素微球鏈接后，將含CAG重復(fù)序列的轉(zhuǎn)錄基因從染色體中分離出來了。
3）分析DNA序列中的點突變 PNA與DNA或RNA鏈形成的PNA/DNA 和 PNA/RNA 熱穩(wěn)定性高且對堿基錯配數(shù)敏感，一個堿基錯配可使Tm值大幅下降。利用PNA此特點可以不用測序就能分析DNA序列中的點突變。如，Czerny等發(fā)明了一種PNA定向PCR鉗技術(shù)，它不需要測序，僅用簡單的一步就能發(fā)現(xiàn)點突變的存在。這種技術(shù)主要用來探測某段DNA片段中有沒有某種已知的點突變。原理是：先設(shè)計好相應(yīng)的PNA片段，如果DNA片段中沒有突變，PNA則與DNA序列牢固結(jié)合，PCR不能進行。如果有點突變，則PNA不能與DNA序列結(jié)合，PCR能順利進行。 這樣通過設(shè)計不同的PCR引物跟相應(yīng)的PNA， 就可以得到針對不同點突變檢測的方法。
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研究進展
肽核酸（PNA）在基因診斷方面的運用
發(fā)布時間：2017/7/14
